Micromatrice tissulaire

Les blocs multi-tissus ont été utilisés pour la première fois en 1986 par H. Battifora; il appelait alors cette technique le « bloc de tissu multitumoral », et il a amélioré cette technique en 1990 (« bloc de tissu en damiers »). En 1998, J. Kononen et ses collaborateurs ont mis au point la technique actuelle, qui utilise une nouvelle approche d'échantillonnage pour produire des tissus de taille et de forme régulières pouvant être disposés de façon plus dense et plus précise.

La technologie de MMT est une procédure technique qui combine des dizaines de milliers d'échantillons de tissus inclus dans la paraffine dans un seul bloc de paraffine. Des carottes de tissu cylindriques (habituellement de 0,6-2,0 mm de diamètre) sont prélevées à partir d'une ou plusieurs régions représentatives d'un bloc de tissu inclus dans la paraffine (bloc donneur), puis elles sont disposées de façon précise dans un nouveau bloc de paraffine « receveur » à l'aide d'un instrument conçu sur mesure.

Jusqu'à 200 sections consécutives de 4-5 µm d'épaisseur peuvent être tranchées à partir de chaque bloc de MMT, placées sur une lame de microscope et traitées comme des sections de tissus ordinaires avec un vaste éventail de techniques (coloration histochimique, immunohistochimie et coloration immunofluorescente, FISH).

Avantages de la MMT

Les MMT sont associées à de nombreux avantages par rapport aux techniques classiques.

• La vitesse des analyses moléculaires est plus de 100 fois supérieure
• Les tissus précieux ne sont pas détruits
• Un grand nombre de cibles moléculaires peuvent être analysées à partir de sections consécutives de MMT

Applications additionnelles de la MMC :

MICROMATRICE CELLULAIRE (MMC)

La MMC a évolué à partir de la micromatrice tissulaire (MMT), et elle se différencie par l'utilisation de cellules fixées au lieu de tissus. Les cellules sont cultivées, mises en suspension dans l'agarose et enrobées dans la paraffine.

• Analyse par immunocytochimie (IC) de tout type de cellules
• Analyse à haut rendement de centaines d'échantillons de cellules sur une même lame
• Plusieurs lames peuvent être générées à partir d'un bloc de paraffine prêt à être analysé avec différents marqueurs

PRÉLÈVEMENT ET DISTRIBUTION DE CAROTTES DE TISSU

• L'appareil Galileo 4500 peut être utilisé pour la MMT, la MMC et comme dispositif de prélèvement d'échantillons pour l'extraction d'acides nucléiques (ADN et ARN) ainsi que pour l'isolement de protéines à l'aide du fixatif approprié
• Les carottes de tissu extraites à partir de régions précises peuvent être distribuées dans des récipients réservés à cet effet pour un traitement ultérieur, comme l'extraction d'ADN, d'ARN, d'ARNmi et de protéines. Des microfioles à centrifuger, des bandelettes ou des microplaques peuvent être utilisées, en fonction des applications en aval. Des analyses parallèles peuvent être effectuées de façon simultanée sur un même échantillon

EXTRACTION D'ACIDES NUCLÉIQUES

• ADN extrait de carottes de tissu (1 mm et 3,5 mm) provenant de prostates, d'utérus et de côlons humains à l'aide d'une matrice à base de silice (Malferrari et al., 2002)
• Le gel d'agarose (0,8 %) révèle la qualité de l'ADN extrait et l'amplification par PCR amplification du gène BRCA1 avec des amorces spécifiques

Applications additionnelles de la MMC :

MICROMATRICE CELLULAIRE (MMC)

La MMC a évolué à partir de la micromatrice tissulaire (MMT), et elle se différencie par l'utilisation de cellules fixées au lieu de tissus. Les cellules sont cultivées, mises en suspension dans l'agarose et enrobées dans la paraffine.

• Analyse par immunocytochimie (IC) de tout type de cellules
• Analyse à haut rendement de centaines d'échantillons de cellules sur une même lame
• Plusieurs lames peuvent être générées à partir d'un bloc de paraffine prêt à être analysé avec différents marqueurs

PRÉLÈVEMENT ET DISTRIBUTION DE CAROTTES DE TISSU

• L'appareil Galileo 4500 peut être utilisé pour la MMT, la MMC et comme dispositif de prélèvement d'échantillons pour l'extraction d'acides nucléiques (ADN et ARN) ainsi que pour l'isolement de protéines à l'aide du fixatif approprié
• Les carottes de tissu extraites à partir de régions précises peuvent être distribuées dans des récipients réservés à cet effet pour un traitement ultérieur, comme l'extraction d'ADN, d'ARN, d'ARNmi et de protéines. Des microfioles à centrifuger, des bandelettes ou des microplaques peuvent être utilisées, en fonction des applications en aval. Des analyses parallèles peuvent être effectuées de façon simultanée sur un même échantillon

EXTRACTION D'ACIDES NUCLÉIQUES

• ADN extrait de carottes de tissu (1 mm et 3,5 mm) provenant de prostates, d'utérus et de côlons humains à l'aide d'une matrice à base de silice (Malferrari et al., 2002)
• Le gel d'agarose (0,8 %) révèle la qualité de l'ADN extrait et l'amplification par PCR amplification du gène BRCA1 avec des amorces spécifiques